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點擊次數:2134 更新時間:2020-04-07
分子篩為什么可以去除鹽,其實分子篩本身可以用于去除鹽,如果要更換離子柱,須先去除鹽。否則,蛋白質就掛不上了。脫鹽一般可以使用SephadexG10、25和50,也可以使用透析法。
分子篩層分析其應用領域主要包括以下幾點
1)脫鹽
高分子(蛋白質、核酸、多糖等)溶液中的低分子量雜質可以通過分子篩層分析去除,這種操作被稱為脫鹽。本法脫鹽操作簡單快捷,蛋白質和酶類等在脫鹽過程中不易失活,樣品體積到柱床體積的25%-30%,為了防蛋白質脫鹽后溶解度下降,沉淀吸附在柱子上,一般用醋酸銨等揮發性鹽類緩沖液平衡分析柱,加入樣品,用同樣的緩沖液清洗,收集的清洗液用冷凍干燥法清除揮發性鹽類。
2)分離純化
分子篩層分析廣泛應用于酶、蛋白質、氨基酸、多糖、激素、生物堿等物質的分離。
43)測定高分子物質的分子量:
用一系列已知分子量的標準品放入同一凝膠柱中,在同一條件下分析,記錄每分鐘成分的清洗體積,用清洗體積對分子量的對數作圖,在分子量范圍內可以得到直線,即分子量的標準曲線。在測未知物質的分子量時,可將該樣品放入測量標準曲線的凝膠柱中清洗后,根據物質的清洗體積,在標準曲線中檢測出分子量。
分子篩層析時分離效果依賴于以下因素
填料的顆粒大小
填料顆粒的均勻程度
裝柱的好壞
樣品的體積和黏度
流速
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